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hTERT介导的永生化原代细胞

作者: 佚名    转贴自: 本站原创    点击数: 779


众所周知,原代细胞最真实地反映特定细胞在体内的生理状态。然而,它们一般传不了几代就会停止增殖并死亡。对于一些需要大量细胞进行的实验比如生化分析,遗传筛选等,无法使用原代细胞。这阻碍了原代细胞在实验室的应用。另外,一些稀有疾病获得的血液或者组织样本比较少,导致获得的细胞数目比较有限。限制了后续实验的正常进行。而对¬¬¬¬于可以无限传代的细胞系,虽然没有衰老的问题,但它们通常包含许多遗传突变,表现出不稳定的核型,蛋白质表达模式也与细胞类型不相称。
问题来了, 是否有一种办法可以使原代细胞获得永生化的同时维持正常细胞的生理特性呢?
引起细胞永生化的因素很多,其中端粒酶在这一过程中发挥重要作用。端粒是真核细胞染色体末端的一种特殊结构。由端粒DNA和端粒蛋白质组成。正常动物细胞DNA的端粒随着细胞分裂而缩短,当缩短到一定长度时细胞将停止增殖并死亡。
将原代细胞转染端粒酶逆转录酶cDNA(human telomerase reverse transcriptase, hTERT),可以激活端粒酶活性,维持端粒长度,阻止染色体端粒降解,诱导细胞永生化。
有研究表明,hTERT介导的永生化细胞可保持正常细胞的生理特性。通过对多种hTERT永生化细胞系研究确认,这些细胞仍然具有相应的表型和稳定的核型。而使用原癌基因导致细胞永生化的,细胞往往会发生核型变化,特别是当细胞被多次传代以后。
通过hTERT介导的永生化细胞可以观察到以下特性:
1正常细胞周期控制
2接触抑制
3锚定依赖
4保留对血清和有丝分裂原的正常生长反应
5需要生长因子进行增殖
6具有正常核型
7没有与转化相关的变化,如致瘤性,可以在软琼脂上生长
hTERT介导的永生化细胞系结合了原代细胞的生理属性和细胞系的长期培养特性,同时避免前者的衰老和后者的不稳定核型。此外,在许多研究中,hTERT介导永生化细胞可以诱导分化为不同的细胞,这些分化后的细胞具有特定组织特性并表达分化细胞特异性蛋白,并可以形成在只有在体内才能形成的某型结构。
ATCC人端粒酶逆转录酶(hTERT)永生化细胞系代表了细胞生物学研究的一个重大突破,联合了原代细胞的生化属性以及传统细胞系长期培养的特性。
 即使在高代次,也能够维持细胞在体内的生物学特性
 生命周期是原代细胞的5倍
 基本维持二倍体核型
 与原代细胞比较,基因表达基本不发生变化
 没有批间差
 减少实验结果的不一致性
ATCC拥有目前世界上最大的、品种最丰富的细胞系、微生物、以及重组DNA原料,是科研工作者公认的提供世界级的可靠的研究材料的供应商,ATCC一如既往为全世界的科学家提供最可靠的生物资源,为实验结果的真实性和可靠性保驾护航。